Revista de VIH y virus retro Acceso abierto

Abstracto

Un inmunoensayo de microesferas multiplex de alto rendimiento basado en la proteína no estructural 1 discrimina tres infecciones por flavivirus

El rey Wei Kung

Los cuatro serotipos del virus del dengue (DENV) son la principal causa de infecciones por arbovirus en humanos. Los recientes brotes del virus Zika (ZIKV) y las complicaciones asociadas en las regiones endémicas del DENV ponen de relieve la necesidad crítica de pruebas serológicas sensibles y específicas. El ZIKV y el DENV pertenecen al género Flavivirus de la familia Flaviviridae. Las pruebas serológicas tradicionales basadas en la proteína de la envoltura para infecciones por flavivirus se han visto obstaculizadas por una amplia reactividad cruzada entre diferentes flavivirus. En este estudio, desarrollamos un inmunoensayo de microesferas de IgG de alto rendimiento y multiplexado (MIA) utilizando las proteínas NS1 de DENV1-DENV4, ZIKV y el virus del Nilo Occidental (WNV) para analizar muestras de casos confirmados mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa, incluidas infecciones primarias por DENV1, DENV2, DENV3, WNV y ZIKV, infecciones secundarias por DENV e infecciones por ZIKV con infección previa por DENV. La combinación de cuatro MIA de IgG NS1 de DENV reveló una sensibilidad del 94,3 % y una especificidad del 97,2 % para detectar la infección por DENV. Los MIA de IgG NS1 de ZIKV y WNV tuvieron una sensibilidad/especificidad del 100 %/87,9 % y del 86,1 %/78,4 %, respectivamente. Se encontró una correlación positiva entre las lecturas del ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas y el MIA para diferentes NS1 analizadas. En consonancia con nuestros informes anteriores (Tsai et al. Clin Infect Dis 2017, 65:1829-1836; Emerg Infect Dis 2018, 24: 1355-1359), el panel de infección secundaria por DENV reaccionó de forma cruzada con la NS1 del ZIKV en el MIA de IgG, y el panel de infección por ZIKV con infección previa por DENV reconoció tanto a DENV como a la NS1 del ZIKV. Con base en la relación entre la intensidad de fluorescencia media relativa de la NS1 del ZIKV y la NS1 del DENV1, el MIA de IgG puede distinguir la infección por ZIKV con infección previa por DENV y la infección secundaria por DENV con una sensibilidad del 88,9-90,0% y una especificidad del 91,7-100,0%. El ensayo multiplex y de alto rendimiento podría aplicarse al serodiagnóstico y la serovigilancia de las infecciones por DENV, ZIKV y WNV en regiones endémicas.