Revista de VIH y virus retro Acceso abierto

Abstracto

Una nueva prueba de detección instantánea para distinguir las infecciones respiratorias bacterianas

Fariba Nayeri, Amir Ramezani, Lars Eng y Annette Theodorsson

Antecedentes: En pacientes con síntomas clínicos de infección respiratoria, la identificación rápida de los casos que requieren terapia con antibióticos es crucial para evitar el desarrollo de múltiples bacterias resistentes. Los neutrófilos son miembros importantes de la inmunidad innata y los neutrófilos liberan trampas extracelulares de neutrófilos (NET) para controlar la infección microbiana. Aquí hemos desarrollado una herramienta de diagnóstico asequible, estable, factible y precisa que detecta sustancias con carga negativa (por ejemplo, oligonucleótidos) en el esputo de pacientes con neumonía que mostraron una reacción alta e instantánea a los colorantes de anilina. Evaluamos la capacidad de esta nueva prueba para detectar la infección bacteriana en casos de neumonía. Métodos: Se desarrolló una prueba colorimétrica. Las muestras de esputo sobrantes (n = 467) de pacientes con sospecha de neumonía se analizaron a ciegas utilizando la prueba índice. Estos resultados se compararon con los resultados finales que se determinaron a través de evaluaciones clínicas y de laboratorio independientes realizadas por el médico del paciente. Las muestras de esputo se analizaron más a fondo utilizando ELISA, resonancia de plasmón de superficie, SDS-PAGE y espectrofotometría ultravioleta-visible.

Resultados: La prueba distinguió la neumonía con alta precisión (neumonía adquirida en la comunidad y nosocomial, n = 73 y controles n = 192 sin infección, sensibilidad 97,2%, especificidad 78,2%, valor predictivo negativo 96,4% y valor predictivo positivo 82,6). Los resultados se correlacionaron altamente con la presencia de factor de crecimiento de hepatocitos en las muestras (R = 81%). El resultado positivo de la prueba estuvo presente incluso después de la ultrafiltración de las muestras en filtros de <50 kDa. El espectro UV-vis en muestras con resultado positivo de la prueba mostró un pico a aproximadamente 265 nm que difería significativamente de los controles. Conclusiones: La presencia de proteínas y ácidos nucleicos en el sitio de la infección bacteriana podría indicar liberación de NET de los neutrófilos. La nueva prueba de detección tiene el potencial de diagnosticar la neumonía en una etapa temprana y, por lo tanto, reducir la mortalidad y la morbilidad, guiar la prescripción de antibióticos, monitorear la terapia y reducir el costo, lo que es especialmente vital en centros mal equipados y áreas rurales.

Nota: Este trabajo fue presentado en la 8va ^Edición de la Conferencia Internacional sobre Enfermedades Infecciosas del 7 al 8 de junio de 2018, Londres, Reino Unido.