Revista de Farmacia e Investigación Farmacéutica Acceso abierto

Abstracto

Bioprospección e ingeniería racional de nuevas L-asparaginasas para presentar un mejor biofármaco para el tratamiento del cáncer de sangre

Tales A Costa-Silva, IM Costa, GS Agamez-Montalvo, A Pessoa y G Monteiro

Introducción : La L-asparaginasa (EC3.5.1.1) producida por bacterias se utiliza en el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda (LLA). Sin embargo, se han registrado innumerables efectos secundarios por el uso de L-ASNasa bacteriana durante el tratamiento de la LLA. Otros inconvenientes asociados con el tratamiento con L-asparaginasa procariota son las reacciones de hipersensibilidad, la baja estabilidad térmica, la degradación de las proteasas humanas y la rápida eliminación.

Objetivos : Se han utilizado algunas técnicas para superar estos inconvenientes, como la bioprospección de fuentes eucariotas o la modificación de la L-asparaginasa bacteriana comercial mediante mutagénesis dirigida. Para encontrar fuentes eucariotas de L-ASNasa, se utilizaron en este estudio 20 hongos filamentosos, que se aislaron del microbioma de la medusa Olindias sambaquiensis.

Resultados : Seis muestras de hongos aisladas de tentáculos de medusas (estructuras marrones en medusas responsables de la producción de toxinas) mostraron producción de L-asparaginasa mediante el proceso de fermentación sumergida. La actividad más alta fue mostrada por la cepa OS02 con 2,7 U/g. Esta cepa fue seleccionada para la optimización de la producción de L-asparaginasa mediante la metodología de diseño compuesto central de superficie de respuesta. Para la máxima producción de enzima (11,45 U/g), la mejor condición fue el medio modificado Czapek Dox suplementado con L-asparagina y ajustado a pH 7,4 a 32,5 ° C y 190 rpm.

Conclusiones : En relación con la ingeniería de proteínas de la L-asparaginasa bacteriana comercial, utilizamos mutagénesis dirigida para obtener resistencia a la proteasa L-asparaginasa: una nueva variante de la L-asparaginasa de Escherichia coli (EcAII), triple mutante. Los resultados preliminares mostraron que la enzima mutante se expresó en E. coli BL21 (DE3) y conservó la actividad original de la L-asparaginasa. Estas formas proteo de la L-asparaginasa pueden ser biofármacos alternativos con el potencial de mejorar aún más los resultados en el tratamiento de la LLA.