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Abstracto

Método de fluorescencia por HPLC para el análisis enantioselectivo de propranolol en suero de rata utilizando una fase estacionaria quiral basada en polisacáridos inmovilizados

Aymen Al-Suwailem

Se desarrolló y validó un método de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) estereoselectiva para determinar S-( )- y R-(+)-propranolol en suero de rata. La resolución enantiomérica se logró en tris(3,5-dimetilfenilcarbamato) de celulosa inmovilizado sobre una fase estacionaria quiral (CSP) de sílice porosa esférica conocida como Chiralpak IB. Se validó un método analítico simple utilizando una fase móvil compuesta por n-hexano-etanol-trietilamina (95:5:0,4 %, v/v/v) a un caudal de 0,6 mL min y detección de fluorescencia ajustada a longitudes de onda de excitación/emisión de 290/375 nm. Las curvas de calibración fueron lineales en el rango de 10 a 400 ng mL-1 (R = 0,999) para cada enantiómero con un límite de detección de 3 ng mL-1. El método propuesto fue validado de conformidad con las directrices de la ICH en términos de linealidad, exactitud, precisión, límites de detección y cuantificación, y otros aspectos de la validación analítica. Se pudo realizar una cuantificación real de los isómeros de propranolol en suero obtenido de ratas a las que se les había administrado por vía intraperitoneal (ip) una dosis única del fármaco. El método propuesto establecido en este estudio es simple y lo suficientemente sensible como para ser adoptado en los campos de la toxicología clínica y forense. Primero se realizaron estudios de modelado molecular que incluían estudios de minimización de energía y de acoplamiento para ilustrar el mecanismo por el cual el enantiómero activo se une al receptor β-adrenérgico y, en segundo lugar, para encontrar una interpretación adecuada de cómo ambos enantiómeros interactúan con el tris(3,5-dimetilfenilcarbamato) de celulosa CSP durante el proceso de resolución. La última interacción se demostró calculando las afinidades de unión y las distancias de interacción entre los enantiómeros de propranolol y el selector quiral.